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公 司:西安交大保賽生物技術股份有限公司
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證券部:(86 29)83399735 83399736
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高流速4FF瓊脂糖微球    

高流速4B瓊脂糖微球(Bio-Sep 4FF)
產品說明書
  高流速4B瓊脂糖微球是在4B瓊脂糖微球的基礎上經過兩次交聯形成的高交聯基質,微球的化學穩定性及物理性能顯著增強,剛性增加,流速更快,使產品處理時間大大縮短。可用于生物大分子的凝膠層析。
  1. 外觀
  本品為白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
  2. 理化指標
項    目
指    標
基   質
4% 交聯瓊脂糖
排阻極限
60000~20×106 (球蛋白)
形狀
球形
粒徑
50~160 μm
最高流速
250 cm/h*
耐壓
0.1 MPa
耐熱
120℃ pH7水中20min
pH適用范圍
2~14 (短時間,在位清洗),2~12(長時間)
化學穩定性
以下溶液中40℃下穩定;2mol/L NaOH;70%EtOH;30%異丙醇;30%乙腈;1%SDS;6mol/L鹽酸胍;8mol/L尿素
  *檢測條件: 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl
  3. 包裝
  產品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小、保質期、批號、生產日期、生產單位及地址” 等內容。
  4. 貯存
  產品應密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
  用過的柱子貯存在4℃(20% 乙醇)。
  5. 注意事項
  本品應避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中
  6.運輸
  運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
  7.保質期
  暫定5年。
  8.應用
  本產品具有很高的化學穩定性、高流速、較好的機械性能、可多次重復使用等特點,非特異性吸附低,回收率高,可用有機溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,適用于工業規模生產,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的凝膠色譜純化。
  下面簡要介紹介質的使用過程。
  8.1 裝柱
  凝膠過濾介質的使用對裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過柱子上加一個裝柱器來使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進行檢驗。
以下過程為通用介質裝填過程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩定后將柱床壓緊,接好管路。
  ⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
  ⑵選擇一根一定直徑的柱子,長約30~60cm,根據柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。
  ⑶將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
  ⑷用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
  ⑸打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩定。
  ⑹最好用一個裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
  8.2平衡
  讓緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
  8.3上樣
  ⑴樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。含鹽量過大、濃度過小的樣品要先做處理,再上樣。
  ⑵介質對樣品組分的分離是按組分分子量大小進行的,分子量大的先流出來。
  ⑶上樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
  8.4洗脫
  用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
  8.5再生
  一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
  8.6注意
  在裝柱、使用和保存柱子的時候,始終要避免柱子流干氣泡進入。
  若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
  8.6 在位清洗
  ⑴ 對于以離子鍵結合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。
  ⑵ 對沉淀蛋白、對以疏水性結合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。
  ⑶ 對強疏水性結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。
  清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
  8.7注意
  在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
  8.8 去熱源
  用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下方法步驟去除:
  ⑴ 2倍柱體積的70%乙醇
  ⑵ 2倍柱體積50mM Tris-Hcl pH7.5
  ⑶ 1倍柱體積4M尿素
  ⑷ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl
  以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制
  8.9 消毒
  用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
  8.10滅菌
  置介質于高壓滅菌鍋中120℃下20分鐘。
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