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公 司:西安交大保賽生物技術股份有限公司
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藍色高流速瓊脂糖微球    

藍色高流速瓊脂糖微球(Blue Bio-Sep 6FF)
產品說明書

  藍色高流速瓊脂糖微球是將藍色染料F3 GA鍵合在6FF瓊脂糖微球上形成的一種可利用基團親和作用來實現目標產品純化分離的親和色譜介質。用于生物大分子如白蛋白、核苷酸輔助的酶、干擾素和凝血因子等的純化分離。
  
1.外觀:本品為藍色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質。
  
2.理化指標
  
項 目
  指 標
  配 基 F3GA藍色染料
  基 質 6% 交聯高流速瓊脂糖
  形狀 球形
  粒徑 50~160 μm
  蛋白質吸附容量(HSA)18mg/ml
  最高流速(25℃) 700 cm/h*
  耐 壓 0.3 MPa
  耐 熱 pH7水中120℃20min
  工作溫度 4~40℃ pH適用范圍 3~13 (短時間);4~12(長時間)
  化學穩定性 以下溶液中穩定;
  1mol/L NaOH;70%EtOH;;
  8mol/L尿素;3 mol/L(NH4)2SO4
  *柱子:內徑16mm、柱長30cm。柱床高5cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl。
  3. 包裝
  產品以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標簽,注明“品名、體積、顆粒大小、保質期、批號、生產日期、生產單位及地址” 等內容。所選用的包裝應有利于保證產品質量、方便運輸和貯存。
  4. 運輸
  運輸中應避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
  5. 貯存
  產品應密封貯存在4℃~8℃(保存溶液為20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0),通風、干燥、清潔的地方。不能冷凍。 用過的柱子貯存在4℃(20% 乙醇+0.1mol/L KH2PO4,pH8.0)。
  6.保質期:暫定5年。
  7.應用
  藍色高流速瓊脂糖微球是一種親和色譜介質,利用樣品中組分與配基親和性的不同進行分離。用于用于生物大分子如白蛋白、干擾素和凝血因子等的純化分離。
  下面簡要介紹介質的使用過程。
  7.1 裝柱
  ⑴讓所有的材料和試劑達到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。 如樣品為白蛋白,使用的緩沖液如下: 初始緩沖液(平衡液):0.05mol/ L K2HPO4,pH5~7(pH不同,吸附量不同); 洗脫緩沖液:0.05mol/LKH2PO4+1.5mol/ L KCl,pH7.0。
  ⑵根據柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。勻漿作脫氣處理。
  ⑶將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
  ⑷ 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內,注意勿使產生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內自由沉降,連結好柱子頂端柱頭。
  ⑸ 打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
  7.2平衡
  讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。
  7.3上樣
  ⑴樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。
  ⑵一般情況是讓目標產品結合在柱子上,用平衡液洗去雜質。
  7.4洗脫
  再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
  7.5再生
  一般用高鹽濃度的洗脫緩沖液洗,洗10倍以上柱體積,接著用結合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。 若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
  7.6 在位清洗
  ⑴對沉淀蛋白,可用4倍柱體積0.1mol/L NaOH 低流速洗脫,接著用4倍柱體積2 mol/L KSCN洗滌,馬上用5倍柱體積pH8.0的初始緩沖溶液洗滌。
  ⑶ 對強結合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產生氣泡。再馬上用5倍柱體積pH8.0的緩沖溶液洗滌。
  7.7注意
  在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。
  7.8滅菌
  置介質于高壓滅菌鍋中120℃下20分鐘。

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